LC3000液相色譜儀的流動(dòng)相和樣品的使用情況
LC3000液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異,使各組分在作相對運動(dòng)的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。LC3000液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫學(xué)檢驗和無(wú)機分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來(lái)說(shuō),80%~85%的有機物原則上可采用LC3000液相色譜儀分析。
LC3000液相色譜儀操作步驟:
1、開(kāi)機設定參數(檢測波長(cháng)、流速),更換所需流動(dòng)相,檢查色譜柱是否正確。
2、排液置換管路中流動(dòng)相,沖洗進(jìn)樣閥,洗好進(jìn)樣針。
3、沖洗色譜柱進(jìn)行平衡,其間可提前進(jìn)行樣品的處理,樣品信息的注冊。
4、平衡好以后進(jìn)空白試驗,排除系統污染。
5、柱子穩定好以后進(jìn)樣,等待運行結束(其間清洗進(jìn)樣針),積分計算,出具報告。
LC3000液相色譜儀的流動(dòng)相:
1、流動(dòng)相應選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水,酸堿液及緩沖液需經(jīng)過(guò)濾后使用,過(guò)濾時(shí)注意區分水系膜和油系膜的使用范圍;
2、水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換(一般不超過(guò)2天),防止長(cháng)菌變質(zhì);
3、使用雙泵時(shí),A、B、C、D四相中,若所用流動(dòng)相中有含鹽流動(dòng)相,則A、D(進(jìn)液口位于混合器下方)放置含鹽流動(dòng)相,B、C(進(jìn)液口位于混合器上方)放置不含鹽流動(dòng)相;
A、B、C、D四個(gè)儲液器中其中一個(gè)為棕色瓶,用于存放水相流動(dòng)相。
LC3000液相色譜儀的樣品:
1、采用過(guò)濾或離心方法處理樣品,確保樣品中不含固體顆粒;
2、用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱(若為反相柱,則極性比流動(dòng)相大;若為正相柱,則極性比流動(dòng)相?。┑娜軇┲苽錁悠啡芤?,盡量用流動(dòng)相制備樣品液;
手動(dòng)進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量盡量小,使用定量管定量時(shí),進(jìn)樣體積應為定量管的3~5倍;
色譜柱:
1、使用前仔細閱讀色譜柱附帶的說(shuō)明書(shū),注意適用范圍,如pH值范圍、流動(dòng)相類(lèi)型等;
2、使用符合要求的流動(dòng)相;
3、使用保護柱;
4、如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、色譜柱在不使用時(shí),應用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;
6、不要高壓沖洗柱子;
7、不要在高溫下長(cháng)時(shí)間使用硅膠鍵合相色譜柱;